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1、標準溶液的制備 葡萄糖-谷氨酸標準溶液：將葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH）在103℃干燥1小時后，各取150mg溶于稀釋水，加5-10mL接種液，然后用稀釋水稀釋至1000mL，混勻。 2、儀器校準 取葡萄糖-谷氨酸標準溶液167mL，選擇0~400mg/L量程，按BOD5檢測步驟操作。檢測到的BOD濃度應在180mg/L至230mg/L之間。否則需要檢查接種液或?qū)嶒炦^程是否有問題，儀器使用是否有問題。稀釋水應預先保持20℃的恒溫，并曝氣或攪拌使溶解氧飽和。 3、注意事項 ①裝瓶時水樣溫度為20℃左右。不要偏離太多。 ②為保證水中的溶解氧含量，應將水樣鼓泡曝氣1小時或置于敞口燒杯中用磁力攪拌器攪拌半小時以上，使水樣的溶解氧可以飽和。 影響bod測定儀測量的因素 1、溶解氧 由于測試溫度設定在20℃，冬季采集的樣品會出現(xiàn)溶解氧過飽和，夏季采集的樣品在20℃時可能會出現(xiàn)溶解氧欠飽和。因此，這些樣品應在BOD5測定前進行攪拌和曝氣，以便使溶解氧調(diào)節(jié)至約20℃的飽和點。 2、PH值 測試水樣的pH值應調(diào)整為6.7～7.5（pH 7.2）。BOD5讀數(shù)的下降可能是由于被測樣品的pH值超出此范圍。對于含有大量酸或堿的樣品，BOD5讀數(shù)可能低于實際含量。 酸性或堿性水樣應用適當濃度的氫氧化鈉溶液或稀鹽酸中和。所用調(diào)節(jié)溶液的體積不應超過水樣體積的0.5%。如果超過，可以增加調(diào)理液的酸堿濃度，以減少調(diào)理液的體積。 3、溫度 實驗時將主機放置在20℃±１℃的培養(yǎng)箱中。BOD的測定也能超出這一溫度范圍，例如，有實驗證明在35℃測定BOD所需要的時間可以縮短為2.5天，其測定結(jié)果與五日20℃相似。提高溫度所獲得的BOD值與五日20℃條件下測定的結(jié)果有很好的相關(guān)性。 如果在采樣時樣品溫度超過20℃，或樣品溫度不足20℃，可將樣品放在培養(yǎng)箱中恒溫。在樣品測定前要求對樣品進行處理。
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